实验1 显微镜的构造和使用
【实践目的】
1. 认识显微镜的构造。
2. 掌握显微镜的使用方法。
3. 镜下能辨认细胞结构。
【实践材料】
1. 显微镜。
2. 肝组织切片$2HE染色）。
【实践内容与方法】
本实验可巾教师先介绍实验室规则， 并讲韶不教显微镜的构造和使用方法， 再由学生操作、练习光镜的使用， 同时观察辨认细胞膜、细胞质和细胞核， 教师巡回检查指导。
一、光学显微镜的构造
普通光学显微镜由机械和光学两部分构成（实验图1-1$3。
1. 机械部分
$21$3镜座：是显微镜的底座， 用以支撑和稳定镜体， 一般呈马蹄形、方形或圆形。
$22$3镜臂：是显微镜的支柱， 略呈弧形， 是手持握的部位。
$23$3载物台： 是放置切片标本的平台， 中央有一通过光线的圆孔， 其上装有玻片夹或标本推进器， 用来固定玻片标本。在载物台的侧而或上而有推进器螺旋， 用千在前后、左右方向移动玻片。
$24$3镜筒： 是镜臂前上方的空心圆简， 可分直立式和倾斜式两种， 其上端装有接目镜， 下端连接物镜转换器。
$25 $3调焦螺旋：位于镜臂的上端（镜筒直立式光镜） 或下端（镜筒倾斜式光镜） 的两侧， 用于涸节镜筒与载物台的距离， 从而调节焦距。常有两组涸焦螺旋， 即粗洞螺旋（大螺旋） 和细涸螺旋（小螺旋）， 分别进行较大幅度的调节和较精细的涸节。
$26$3物镜转换器：又称旋转盘， 是安装在镜筒下方的圆盘， 可自由转动。盘上有3~4个圆孔， 用以安装不同放大倍数的物镜。
2. 光学部分
$21$3目镜：装在镜简的上端， 其上标有“5X”"lOX" 等放大倍数。镜内可装指针，以指示观察物。
$22$3物镜：装在旋转盘的下面， 一般分为低倍镜$2lOX$3、高倍镜$240X$3和油镜$2100X$3。
显微镜放大倍数＝目镜放大倍数X物镜放大倍数
$23$3聚光器：装在载物台的下方， 可聚集光线， 增强视野的亮度。在聚光器后方的左侧有聚光器升降螺旋， 可使聚光器升降， 从而涸节视野的亮度。聚光器的底部装有光圈， 可开大或缩小， 控制光线的进入最。
$24$3反光镜：位于聚光器的下方， 可以任意方向转动， 它有平、凹两面， 其作用是将光源的光线反射进入物镜。凹面镜有聚光作用， 适于光线较弱时使用， 光线较强时则适用平面镜。
二、显微镜的使用方法
1. 取镜和放置取显微镜时， 右手紧握镜臂， 左手托住镜座。放置显微镜时， 应使镜臂朝向自己，轻放在实验台偏左侧， 以镜座后端离实验台边7~10cm为宜。
2. 对光心打开实验台上的工作灯， 转动粗涸螺旋， 使镜简略升高（或使载物台下降）。＠用拇指和示指旋转转换器（切忌手持物镜转动） 使低倍镜对准通光孔（当转动听到碰叩声时， 说明物镜己对准通光孔中心， 光路接通）。＠打开光圈， 上升聚光器， 左眼在目镜上观察（注意勿闭右眼）， 同时调整反光镜方向， 使视野内的光线均匀明亮。
3. 低倍镜的使用心将玻片标本放在载物台上（有盖玻片的一面朝上）， 用玻片夹固定， 调整位置， 使观察物移至通光孔中央。＠用粗调螺旋将镜简下降（或载物台上升），直至物镜距标本约5mm 时停止（注意操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离）。＠左眼观察目镜， 同时转动粗调螺旋， 使镜筒缓慢上升（或载物台下降）， 当视野中有物像时，改用细调螺旋，直到视野中物像清晰，若第一次未看到物像，就重复上述操作。
4. 高倍镜的使用CD先在低倍镜下找到需要放大观察的结构，并将其移至视野中央，同时把物像调节到最清晰的程度。＠转动转换器，并将高倍镜对准通光孔，并从侧面进行观察（防止镜头碰撞玻片），如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。＠左眼观察目镜，用细调螺旋调节焦距（禁止使用粗涸螺旋），直到物像清晰为止。需要更换玻片标本时，先转开物镜，升高镜筒（或下降载物台），再换标本片，然后从低倍镜到高倍镜重新调节。
5. 油镜的使用CD用高倍镜看清楚结构后，将要观察的部位移至视野中央。＠旋开高倍镜，在要观察的标本部位滴一滴香柏油，然后侧面注视，转动转换器，将油镜头浸入香柏油并对准通光孔，注意镜头勿接触标本片。＠左限在目镜上观察，用细调螺旋调焦，直到看清楚物像为止。＠观察完毕，升高镜筒（或下降载物台），将镜头转开，用擦镜纸擦净油镜上的香柏油，再换一张擦镜纸，颇少许二甲苯擦拭，然后用干净的擦镜纸再擦一次。残留在切片上的香柏油也要用二甲苯将其擦净。
三、细胞结构的观察
肝组织切片的观察： 低倍镜下可看到许多肝小叶的断面，肝小叶内，肝细胞围绕中央静脉，呈放射状排列。换用高倍镜观察，肝细胞呈多边形，体积较大，细胞核圆形，位千细胞中央，核仁明显。有的肝细胞可见双核。
四、使用显微镜应注意的事项
1. 取送显微镜时，应轻拿轻放，切勿斜提或前后摆动。
2. 不可随便取出目镜，以免落入灰尘，影响观察效果。
3. 观察永久标本时，显微镜可略作倾斜，但倾斜角度不可超过45 ° , 以免重心后移而倾倒；观察临时装片时，要加盖玻片，并不得倾斜载物台。
4. 任何时候，都不能一边在目镜中观察，一边下降镜筒，以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。
5. 光学部件如有不洁，应用擦镜纸擦拭，切不可用纱布、手帕以及其他纸张等擦拭，以免磨损镜面。
6. 应防止水、酒精、腐蚀性药品等沾污显微镜。
7. 用完显微镜后，先升高镜筒（或下降载物台），取下标本片，转动旋转盘使物镜呈八字形，并将镜筒下降至最低位置。将反光镜移至垂直位置。用绸布擦拭镜筒、镜臂等处，放回显微镜箱。
【实验报告】
1. 写出如何使用和维护显微镜。
2. 绘图：光镜下细胞的一般结构。注明：细胞膜、细胞质、细胞核。
